盐酸丁咯地尔对SD大鼠坐骨神经损害后神经元的保护作用

目的:观察盐酸丁咯地尔对坐骨神经损害后神经元病理形态的改变.方法:以SD大鼠坐骨神经建立周围神经损害动物模型,观察背根神经节病理切片(光镜、电镜)中的神经元变化情况,考察盐酸丁咯地尔对坐骨神经损害后神经元的影响.结果:盐酸丁咯地尔给药4周后能显著地减轻背根神经节内神经元细胞坏死.结论:盐酸丁咯地尔对坐骨神经损害后神经元有确切的保护作用.     

玉屏苍耳散对实验性AR大鼠维甲酸相关孤儿核受体γt及相关因子表达的影响

目的探究玉屏苍耳散对实验性变应性鼻炎(AR)大鼠维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt)及相关因子表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组,模型组,玉屏苍耳散组,西替利嗪组,每组各10只。采用卵清蛋白致敏法构建AR大鼠模型。灌胃给药,给药剂量按照大鼠体重计算:玉屏苍耳散组(10 g/kg),西替利嗪(2 mg/kg),正常组以及模型组灌胃给予等量的生理盐,酶联免疫法检测各组大鼠鼻粘膜组织细胞因子IL-17、TNF-α、IL-23以及IL-6的分泌水平;HE染色检测各组大鼠鼻黏膜组织损伤程度;采用免疫组化法检测各组大鼠鼻黏膜组织中RORγt蛋白的表达;通过RT-PCR检测各组大鼠鼻黏膜组织中RORγt、IL-17以及IL-23 m RNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠鼻部症状评分、鼻粘膜厚度、细胞因子IL-17、TNF-α、IL-23、IL-6表达及RORγt、IL-17以及IL-23 m RNA表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,玉屏苍耳散组与西替利嗪组上述指标均明显降低(P<0.05)。结论玉屏苍耳散可调控RORγt以及相关因子IL-17、IL-23的表达,发挥对AR具有免疫调节作用。     

依托咪酯对新生大鼠认知功能的影响及其机制研究

目的 探讨新生大鼠依托咪酯麻醉后近远期认知功能及烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）功能的变化。方法 将7 d龄新生大鼠随机分对照组、依托咪酯组、激动剂组,分别单次腹腔注射生理盐水10 ml/kg、依托咪酯5 ml/kg、依托咪酯5 ml/kg+α7nAChR激动剂PNU-282987 5 ml/kg,每组16只。麻醉清醒后2 h和4周,各组随机取8只大鼠进行行为学测试,完成测试后立即取双侧海马组织,采用qRT-PCR和Western blotting检测α7nAChR、乙酰胆碱酯酶（AChE） mRNA和蛋白。结果 麻醉清醒后2 h,依托咪酯组洞板实验探洞次数少于对照组和激动剂组（P <0.05）;3组Y电迷宫实验中正确反应次数和全天总反应时间比较,差异无统计学意义（P >0.05）。麻醉清醒后4周,3组洞板实验探洞次数、Y电迷宫实验中正确反应次数和全天总反应时间比较,差异无统计学意义（P >0.05）。麻醉清醒后2 h,依托咪酯组海马组织α7nAChR mRNA相对表达量低于对照组和激动剂组（P <0.05）,AChE mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和激动剂组（P <0.05）。麻醉清醒后4周,3组α7nAChR、AChE mRNA和蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 新生大鼠依托咪酯麻醉对近期学习记忆能力和远期认知能力无明显影响,但可一过性影响新生大鼠近期探索能力,其机制可能与抑制海马nAChR功能有关。     

新生大鼠单侧基底核出血对神经功能的影响观察

目的：探析新生大鼠单侧基底核出血对神经功能产生的影响。方法：抽取出生第10 天的54 只新生大鼠,根据随机数字分组的原则随机分为正常对照组（normal control group,NC,n=18）、假手术组（sham operation group,SH,n=18）、脑出血组（cerebral hemorrhage group,CH,n=18）,通过立体定位仪将25 μL 自体血注入大鼠左侧脑尾状核位置,完成脑基底核出血模型的建立工作。NC 组不采取任何处理干预,给予正常饲养,SH 组在大鼠左侧尾状核位置刺入微量注射泵针头,不注血,其他处理和CH 组相同。对比3 组大鼠不同时间点神经功能评分、白天开场实验结果、晚上开场实验结果等指标。结果：大鼠在造模之后神经功能呈现不同程度损伤,SH 组大鼠有着相对轻微的神经受损症状,能在短时间内恢复,在手术后72 h 能全部康复;CH 组大鼠发生肌张力改变以及偏瘫的情况;与SH 组、NC 组相比,CH 组大鼠在d 1、d 3 的神经功能评分明显较高（P<0.05）;SH 组、NC 组大鼠在d 1、d 3、d 7、d 14 的神经功能评分对比差异不大（P>0.05）;和SH 组、NC 组大鼠白天开场实验结果相比,CH 组大鼠理毛次数、直立次数、穿越格子数等明显较多（P<0.05）;和SH 组、NC 组大鼠晚上开场实验结果相比,CH 组大鼠直立次数、穿越格子数等明显较多（P<0.05）。结论：大鼠在发育期会出现单侧基底核局灶性出血损伤症状,有着可代偿性、可修复性等基本特征,大部分不会出现严重神经运动功能障碍遗留的情况,但会引起非选择性注意水平降低、自主活动增多等症状。     

硫氧还蛋白还原酶 TrxR2在颅脑损伤大鼠皮质的表达变化

目的：探究硫氧还蛋白还原酶2（TrxR2）在颅脑损伤大鼠皮质的动态表达变化。方法54只雄性 SD 大鼠,随机分为正常对照组（n =6）和颅脑损伤组（n =48）。颅脑损伤组采用改良的 Freeny＆#39;s 自由落体装置制作颅脑损伤大鼠模型,正常对照组不做处理。伤后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d,采用实时荧光定量 PCR （quantitative real-time PCR,qRT-PCR）和Western blot 检测挫伤区周围皮质 TrxR2 mRNA 和蛋白的表达变化情况。结果 qRT-PCR 结果显示：皮质中 TrxR2 mRNA 颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,7 d 恢复正常;颅脑损伤组伤后1 h~3 d 各时间点 TrxR2 mRNA 表达明显高于正常对照组（均 P ＜0.05）。Western blot 检测显示：TrxR2蛋白在颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,14 d 恢复正常;颅脑损伤组1 h~7 d 各时间点 TrxR2蛋白表达高于正常对照组（均 P ＜0.05）。结论颅脑损伤后 TrxR2表达增多,提示 TrxR2作为一种急性应激反应蛋白参与颅脑损伤早期抗氧化应激反应。     

白藜芦醇对急性胰腺炎肺损伤大鼠树突状细胞的影响

目的 观察白藜芦醇（resveratrol,Res）对重症急性胰腺炎（SAP）肺损伤大鼠树突状细胞（DC）的影响.方法 36只SD大鼠随机分为三组：假手术组、SAP模型组、Res治疗组（Res 10 mg/kg）,每组各12只.各组SD大鼠于制模后12 h处死,行胰腺及肺组织病理学检查和评分.提取肺树突状细胞,流式细胞仪检测DC表型CD80表达,并检测IL-12的分泌水平.结果 Res组肺和胰腺组织病理学评分分别为（3.49±1.02）和（6.43±1.40）,而SAP组分别为（6.12±2.02）和（11.00±2.58）,Res组评分均显著降低（P＜ 0.05）.SAP组DC细胞表面分子CD80阳性表达率为（45.3±6.7）％,而Res组为（20.1±3.2）％,显著低于SAP组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Res组和SAP组DC分泌IL-12浓度分别为（1 676.5±121.8） g/L和（4 436.4±169.8） g/L,Res组IL-12浓度显著低于SAP组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Res能显著减轻SAP时肺和胰腺组织损伤,其机制与抑制肺DC活化有关.     

长期应激对大鼠学习与记忆及纹状体边缘区c-Fos、c-Jun表达的影响

目的：探讨长期应激对大鼠学习、记忆及及纹状体边缘区即刻早期基因表达的影响.方法：将40只成年雄性SD大鼠分为两组：每组20只.应激组和对照组, 应激组大鼠持续暴露于应激原环境中达3周,用Morris水迷宫和Y 迷宫作业测试其空间学习与记忆成绩, 再应用免疫细胞化学方法检测c-Fos、c-Jun蛋白在纹状体边缘区内的表达.结果：（1）Morris水迷宫测试：应激组大鼠应激后寻找平台的潜伏期较对照组明显延长（P＜0.05）,Y迷宫测试：应激组大鼠寻找安全区的正确率明显低于对照组（P＜0.01）;（2）应激组纹状体边缘区c-Fos、c-Jun蛋白表达水平较对照组明显下调（P＜0.05）.结论：长期应激可减弱学习与记忆能力, 纹状体边缘区即刻早期基因表达变化可能是应激影响学习与记忆的机制之一.     

肾衰Ⅱ号方对肾功能衰竭大鼠肠通透性及微炎症的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对肾功能衰竭大鼠肠通透性及微炎症的影响,探讨其作用机制。方法采用5/6肾切除法制备大鼠肾功能衰竭模型。40只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、肾衰Ⅱ号方组和阳性对照组。各给药组给予相应药物,假手术组和模型组给予等量生理盐水,共60 d,处死前3.5 h均给予内毒素10 mg/kg灌胃。测试盒分析仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量,HE染色观察肾脏、肠道病理变化,鳌试剂法检测下腔静脉血浆内毒素含量,ELISA检测相关炎症因子水平,免疫组化和RT-PCR分别检测肠紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin蛋白和mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织结构紊乱,Cr和BUN、内毒素及炎症因子水平明显升高(P<0.05),Claudin-1、Occludin蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组大鼠肾组织病理变化减轻,肾功能改善,内毒素及炎症因子水平明显降低(P<0.05),Claudin-1、Occludin蛋白表达明显升高(P<0.05),mRNA表达无明显变化。结论肾衰Ⅱ号方可改善5/6肾切除大鼠肾功能水平,调整肠道通透性,减少肠源性内毒素入血,从而改善模型大鼠微炎症状态。     

迷迭香酸通过AMPK/mTOR通路减轻新生大鼠缺血缺氧性脑损伤研究

目的 探讨迷迭香酸对新生大鼠缺血缺氧脑损伤（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE）的影响,及其对单磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）/雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）通路的调控作用,初步探讨其脑保护机制。方法 取7 d龄SD新生大鼠,随机分为对照组、模型组、迷迭香酸（300 mg/kg）组、AMPK/mTOR激动剂MT6378（10 mg/kg）组、AMPK抑制剂GSK-690693（30 mg/kg）组和迷迭香酸（300 mg/kg）+MT6378（10 mg/kg）组,每组20只。建立HIE模型,给予相应药物进行干预,采用TTC染色法检测大鼠脑梗死情况;透射电镜（TEM）观察大鼠海马神经元结构损伤及自噬状况;免疫荧光法检测大鼠海马神经元自噬标记物微管相关蛋白1轻链3B（microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B）阳性表达;TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡率;免疫组化法检测大鼠海马神经元磷酸化AMPK（p-AMPK）阳性表达;Western blotting检测大鼠海马组织活化的半胱氨酸蛋白酶3（cleaved Caspase-3）、mTOR及其磷酸化蛋白（p-mTOR）、Unc-51样自噬激活激酶1（uncoordinated-51 like autophagy activating kinase 1,Ulk1）及其磷酸化蛋白（p-Ulk1）、LC3B表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠脑梗死严重,海马神经元结构损伤及自噬空泡形成较多,细胞自噬及凋亡水平升高,AMPK/mTOR通路活化（P<0.05）。与模型组相比,迷迭香酸组及GSK-690693组大鼠脑梗死、海马神经元结构损伤、凋亡及自噬减弱,AMPK/mTOR通路被抑制（P<0.05）;MT6378组海马组织AMPK/mTOR通路进一步激活,大鼠脑梗死、海马神经元结构损伤、凋亡及自噬进一步加重（P<0.05）;MT6378可逆转迷迭香酸的上述作用（P<0.05）。结论 迷迭香酸可能通过抑制AMPK/mTOR通路激活,降低海马神经元自噬及凋亡进程,发挥抗HIE脑损伤作用。     

葛根芩连汤干预2型糖尿病前期大鼠的代谢机制研究

目的探讨葛根芩连汤对高脂诱导的2型糖尿病大鼠预防作用的代谢机制。方法将SD大鼠随机分为正常组(8只)和高脂造模组(40只),分别使用基础饲料和高脂饲料喂养12周。高脂造模组大鼠产生胰岛素抵抗(IR)后,将高脂造模组大鼠再随机分为模型组及葛根芩连汤低、中、高剂量组(1.65、4.96、14.86 g·kg-1),每组8只。模型组及不同剂量给药组继续给予高脂饲料喂养,给药组给予不同剂量的葛根芩连汤进行干预,灌胃给药,给药体积为10 mL·kg-1,每天1次,连续16周。检测大鼠空腹血糖值及空腹胰岛素含量,计算IR指数;使用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UHPLC/Q-TOF-MS)结合多元分析方法,分析大鼠血清中的内源性代谢物及其变化差异,寻找葛根芩连汤干预IR大鼠及预防2型糖尿病的潜在生物标记物。结果高脂饲料喂养12周后,与正常组比较,造模组大鼠的IR指数明显升高(P<0.05),血糖无明显变化(P>0.05)。给药16周后,与正常组比较,模型组大鼠的IR指数及血糖值均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,葛根芩连汤低、中剂量组大鼠的IR指数显著降低(P<0.01),葛根芩连汤高剂量组的IR指数无明显变化(P>0.05);葛根芩连汤低剂量组的空腹血糖值明显降低(P<0.05),而葛根芩连汤中、高剂量组的空腹血糖值无明显变化(P>0.05)。大鼠血清代谢组分析鉴定共得到4种潜在代谢标志物,分别是Hippuric acid(马尿酸)、12-Ketodeoxycholic acid(12-去氧胆酸)、3-Oxo-4,6-choladienoic acid和LysoPC[20∶4(5Z,8Z,11Z,14Z)](溶血磷脂酰胆碱,LPC)。结论葛根芩连汤可以降低IR大鼠的胰岛素抵抗指数,同时可预防血糖升高,其机制可能与调节胆汁酸代谢、磷脂代谢以及肠道菌群代谢有关。